磁珠法DNA胶回收试剂盒(96孔)

产品货号：

GS0107

中文名称：

磁珠法DNA胶回收试剂盒(96孔)

英文名称：

Mag-BB 96 Well DNA Gel Purification Kit

产品规格：

2×96T|10×96T

发货周期：

1～3天

产品价格：

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本制品是在我司磁珠法胶回收试剂盒的基础上进行改进、一次可同时处理96个样品的试剂盒。该试剂盒适用于从TAE和TBE琼脂糖凝胶中回收100bp～30kb的DNA片段，回收效率可达70%。该试剂盒中的纳米磁珠能够特异性吸附核酸分子，去除其他杂质，得到高质量的DNA回收产物。所得到的DNA可直接用于酶切、连接、测序等后续的分子生物学实验。

适用范围广，回收效率高，对于100bp～30kb之间的DNA片段回收效率在70%以上，尤其对于长片段DNA的回收，磁珠法比柱式法的回收效率高出20%左右。
操作简单快速，整个回收过程仅须30分钟左右。
无需离心，实现DNA回收的高通量化和自动化。
一次可同时处理96个不同的样品。

组分	2×96T	10×96T
Buffer MB2	100mL	500mL
QuMag Beads	20mL	100mL
Deep Well Collection Plate	2块	10块
96 Well Storage Plate	2块	10块
TE Buffer(pH8.0)	10mL	50mL

保存：室温。

Buffer MB2中含有刺激性的化合物，操作过程中应穿上实验服，戴好乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，防止吸入口鼻。沾染皮肤或眼睛后，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医生的帮助。

准备工作

自备材料：磁分离板、水浴锅、70%乙醇。
Buffer MB2在低温下可能产生沉淀，使用前请检查，如有沉淀，请于37℃溶解沉淀。请提前将水浴锅调至65℃备用。

通过琼脂糖凝胶电泳尽可能将目的DNA片段与其它片段分开，用干净的手术刀片将含目的DNA片段的琼脂糖凝胶块切下，放入Deep Well Collection Plate中。
- 尽可能多地去掉不含目标DNA的琼脂糖。
- 若胶块体积太大，可先将胶块切成小块。
- 切胶过程尽可能快，减少DNA在紫外线中的暴露时间以降低对DNA的损伤。
根据胶块的重量，按每100mg琼脂糖胶块（如胶块不足100mg则用水补充至100mg）加入200μL Buffer MB2。
将含有胶块的Deep Well Collection Plate置于65℃水浴5～10min，间或混匀，直至胶块完全溶化。
- 胶块完全溶化即可，过长时间的处理可能导致DNA损伤。
取出Deep Well Collection Plate，加入100μL QuMag Bead，吸打混匀，室温结合3min，间或混匀。
- 加QuMag Bead solution之前，请充分混匀。
将Deep Well Collection Plate置于磁分离板上1～2min，待QuMag Beads完全吸至孔壁上，吸弃上清，从磁分离板上取出Deep Well Collection Plate。
- 吸弃上清前，若孔口粘有少量QuMag Beads，请用上清液将其洗至Deep Well Collection Plate内，以确保所有QuMag Beads吸附至孔壁上。
- 吸弃上清时请勿吸入QuMag Beads，尽量吸净上清。
- 从磁分离板上取出Deep Well Collection Plate后，若有少量上清，请将Deep Well Collection Plate置于磁分离板上，再次吸取上清。
加入900μL 70%乙醇，吸打混匀，然后将Deep Well Collection Plate置于磁分离板上1min，待QuMag Beads完全吸至孔壁上，吸弃上清，从磁分离板上取出Deep Well Collection Plate。
重复步骤6一次，55℃恒温箱中干燥5～7min至管内无液体残留。
- 干燥前，请尽量吸净孔内的液体。
- 干燥前，若出现液体挂壁现象，可将Deep Well Collection Plate短暂离心之后，再将其置于磁分离板上，待所有QuMag Beads完全吸至孔壁之后再吸净孔内的液体。
加入50μL TE Buffer (pH8.0)，使QuMag Beads充分悬浮在TE buffer中，室温洗脱3～5min，间或混匀。
- 请将孔壁上所有QuMag Beads悬浮在TE Buffer中。
- 根据实验需要可将TE Buffer用无菌的双蒸水（pH>7.5）代替。
将Deep Well Collection Plate置于磁分离板上1min，待QuMag Beads完全吸至孔壁上，小心吸取上清至96 Well Storage Plate，即获得纯化的目的DNA。
- 吸取上清前，请确保QuMag Beads完全吸至孔壁，请勿吸入QuMag Beads，否则影响产物纯度。

DNA回收效率较低或者未回收到目的片段
- 胶块溶解不完全。可适当延长水浴时间，并增加颠倒混匀的频率辅助溶解。
- 胶块体积太大，溶胶困难。可先将胶块切碎，再水浴溶胶。
- 结合不充分。加入QuMag Beads之后，请将其充分混匀，并使QuMag Beads处于悬浮状态。
- 操作过程中丢失QuMag Beads。结合及洗涤过程中可能有少量的QuMag Beads粘在孔口上，吸弃上清前请用少量的上清液清洗孔口，使粘在孔口的QuMag Beads也吸附在孔壁上。
- 洗脱液不合适。洗脱缓冲液的pH值对洗脱效率有影响，如果使用水进行洗脱，请确保其pH值> 7.5，pH值过低可能导致低洗脱效率。
- 洗脱过程操作不当。洗脱时请将孔壁上所有QuMag Beads完全悬浮在TE Buffer中。
- 洗脱时间较短。加入TE Buffer之后请将QuMag Beads充分悬浮在TE buffer中，洗脱时间3～5min，每隔1min吸打混匀一次。
回收DNA进行后续酶切反应效率低
- 乙醇有残留。请吸弃上清之后从磁分离板上取出Deep Well Collection Plate，放置2min之后再将其置于磁分离板上1min，吸净管底的液体。若出现残液挂壁现象，请短暂离心之后将其置于磁分离板上1min，吸净孔内的液体。
- QuMag Beads洗涤不充分。向孔中加入70%乙醇之后，请充分混匀，使QuMag Beads充分悬浮在洗涤液中。
- QuMag Beads没有完全干燥。请将QuMag Beads完全干燥，保证无乙醇残留。
- 最后一步吸取上清时吸入QuMag Beads。请确保所有QuMag Beads吸至孔壁上，再吸取上清。如果不小心吸入QuMag Beads，请将上清液放回原孔，待QuMag Beads完全吸至孔壁之后重新吸取上清。或者将吸取的上清DNA溶液10000rpm离心2min，再取上清。
- 琼脂糖质量差。请选用高质量的琼脂糖。
琼脂糖凝胶胶块不溶
- 琼脂糖质量差。请选用高质量的琼脂糖。
- 含目的片段的胶块在空气中放置时间过长，使胶块失水、干燥。建议切胶后立即进行胶回收，或将胶块保存在4℃或-20℃备用。
- 配制琼脂糖凝胶的电泳缓冲液浓度过高或陈旧。应重新配制缓冲液。
洗脱液的选择
- 洗脱液可以根据后续实验的需要来确定。一般情况下，若需要进行测序反应，请用双蒸水洗脱。如果需要长期保存DNA，请用TE Buffer洗脱。

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